免疫組織化学は、可視化する方法の改良と検出器（顕微鏡）の進歩により、様々な手法が使えるようになりました。本実習では、免疫組織化学の中でもとりわけ汎用性の高い、ABC（avidin-biotin complex）法による酵素抗体法を習得することを目的としています。予め準備したラット下垂体凍結切片を用いて、抗体反応から発色反応までの一連の操作を実際に体験していただきます。手技自体はピペットマン操作ができる方であれば難しいことはありません。手技上のコツやトラブルシューティング、結果を左右するキーポイント、結果を解釈する上での注意点などについても詳しく説明する予定です。

　HeLa細胞を用いて、蛍光抗体法による免疫染色を行います。検出方法には直接法と、間接法があります。直接法では、標的に対する蛍光標識した特異抗体を用います。抗原抗体反応が1回で済むため操作の手間と時間が少ないのですが、反面で各種抗体ごとに蛍光色素を標識する必要があり間接法と比較して汎用性が低いです。一方、間接法では、例えばウサギで作製した一次抗体とそれに対する蛍光標識二次抗体を用います。抗原抗体反応が2回のため手間と時間がかかりますが、1つの一次抗体に対し複数の二次抗体が結合する結果、反応が増強するため直接法と比較して検出感度が高くなります。本実習では、HeLa細胞を固定後、間接法を用いて細胞内小器官を可視化します。

　In situハイブリダイゼーション（ISH）法は、組織切片上で特定の遺伝子発現状態とその局在について可視化する方法論です。本コースでは、講習会で解説するISH法に基づいて実習を行います。具体的にはマウスのパラフィン包埋切片を用いて、細胞内に豊富に存在する28S rRNAに相補的な合成オリゴDNAプローブを利用してISH 法の基本的な技術を習得していただきます。長年にわたる私どもの経験を踏まえ、ISH法の実験の「コツ」や様々な問題点の解決法について具体的に解説し、初めてISH法を試みようとする研究者の皆様のみならず、経験者の方々にも役に立つ技術講習会を実施したいと考えています。

　解析技術の進化により遺伝子発現プロファイル作成、空間トランスクリプトーム、空間オミックスなど、より複雑な解析結果を速やかに取得できる昨今、その対象となる生体組織からのサンプリングにも質、量、速度が求められています。また、組織切片から細胞群の高速回収を主目的とするレーザーマイクロダイセクション（LMD）でも、96穴PCRプレートへの回収、AIでの画像処理を活用した領域選択など、多量サンプリングに特化した新たな機能が備えられています。今回の講習では、これらの実験系を視野に入れ、より適した凍結標本作成、固定、染色方法のコツ、LMDによるサンプル回収まで一連の流れをご覧いただけます。さらに、「川本法」開発者の川本忠文先生の講演と研究相談会を予定しています。

　画像解析――それは、“画像”から必要な情報を“数値”として取り出す技術を指し、細胞のカウントや組織の面積率算出などに利用されています。ただし、いざ画像解析に取り組もうとしても専門的な情報ばかりが満ち溢れており、初学者にはハードルが高いと言わざるを得ません。そこで本コースでは【初学者向け】に、様々な画像解析に応用可能な「画像解析の基本的な流れ」について、座学および実習を通じて学んでいただきます。座学では「画像処理と画像解析の違い」「２値化とは」など基礎的な用語も含めて講義し、実習ではフリーソフトでもお試しいただけるように一つ一つの手順を伝授します（当日は画像解析ソフトWinROOFシリーズを活用）。また、現在解析にお困りの画像データ（JPEGファイル等）をお持ち込みいただければ、解析手法をその場でご一緒に考えさせていただきます。この機会に奮ってご応募いただけますと幸いです。

　ウェスタンブロットがシンプルウェスタン（キャピラリー全自動ウェスタンブロット）に進化いたしました。30分でウェスタンを行える時代です。プレーティングさえできれば誰でも、３時間後、ハンズフリーで結果を得ることができます。ウェスタンの全自動化により、優れた定量性、優れた再現性で正確な結果を取得いたします。本コースでは、弊社シンプルウェスタンを用いて、標的タンパク質の発現を確認するだけでなく、定量測定などタンパク質発現解析を理解することを目指します。