微生物專題

微生物專題

實驗原理

(一)接種細菌方法

細菌的接種方式，因不同培養機種類而相異。若是接種至固體培養基，可用劃線法與塗抹法。若是接種至半固體培養基，則可用穿刺法。當我們進行接種時，需在無菌台操作，以避免有雜菌汙染。

(運用熱對流，將酒精燈上方空氣加熱消毒，並將空氣運送到周圍環境下沈，以使酒精燈周圍形成類無菌環境，避免進行微生物實驗的器材受到其他微生物污染。 )

(二)細菌純化

1. 分區劃線法：利用劃線法，將細菌菌落快速稀釋分散於營養plate上

2. 稀釋塗抹法：先將混合菌液稀釋，再用三角玻棒均勻塗抹於營養plate上

3. 倒皿法：將稀釋菌液與(加熱)溶解的培養基混合，直接倒在plate上

實驗步驟

(一)區劃線法：

1.接種環過火。

2.取用助教提供之E. coli進行第一區的劃線。

3.接種環再次過火。

4.劃過上一區之E. coli一次後進行下一區的劃線，最後形成3～4區。

(二)塗抹法：

1.三角玻棒過火。

2.用pipetman 取 100 μL 的E. Coli稀釋液滴在培養基上。

3.以三角玻棒將稀釋液均勻散布在培養基上。

(三)菌落懸浮法：

1.接種環過火。

2.取用助教提供之E. Coli，將接種環放入培養液中，並混和均勻。

實驗步驟

1. 共有三盤培養基，兩盤分別比較照射UV五分鐘與二十分鐘後細菌的生長狀況；

另一盤則是用以比較不同化學成分對細菌生長的影響。

2. 以三角玻棒均勻的塗抹稀釋後的0.1ml菌液於兩個培養基中，分別標示為照射UV五分鐘與照射UV二十分鐘

3. 聶子過火以後， 夾取五個圓形濾紙貼於培養基中，以簽字筆分別標示加入的五種化學物質，以方便觀察。

五種化學物質分別為Ampicillin，蒜頭萃取液，漱口水，漂白水，對照組:無菌水

4. 將各菌盤正放，以避免紙錠掉落，至於37度隔夜培養

5.觀察各個化學物質抑制細菌生長的情形，測量抑制圈的直徑(mm)並且記錄。

圖片來源 https://zi.media/@yidianzixun/post/ZK2mER