數字 500MHz 代表
1.磁場強度
2.氫原子共振頻率
內部構造
1.磁鐵:產生恆定的磁場
2.探頭:探測核磁共振的信號
3.譜儀:紀錄探測結果
﹝外部線圈電阻為零,具有高電流﹞
4.外部填充液態氮維持低溫(4K)
1.每一個凸起代表一個氫原子訊號
﹝一個蛋白質有100~1000個胺基酸 → 一個胺基酸有10多個質子 → 一個質子一個訊號﹞
2.橫軸為頻率(單位ppm)
﹝Ex 舉 500 MHz 為例 M=106 ppm=10-6 橫軸差一格=差500Hz ﹞
3.越往右電子雲越厚,感受到的頻率越低
﹝以前以 electron density 最高的 Si(CH3)4 作為零點進行比較(定位0ppm)﹞
定義:各種有機分子中,因為質子受到屏蔽效應的程度不同,所以導致在核磁共振譜上,所產生的吸收峰位置不同。
目的:為了建立一個獨立、不受外在磁場影響的數值
1.與 1D﹝觀測訊號﹞相比 2D 偏向於觀測兩個訊號間的關係
2. Cross Pick:﹝X軸座標不等於Y座標) 2個proton 在光譜產生交互作用
TOCSY:測量鍵結關係(3個共價鍵以內)
NOESY:測量距離關係(空間上)
藍色:NOESY ﹝提供胺基酸內及前後胺基酸的訊息﹞
紅色:TOSCY ﹝提供同一個胺基酸內的訊息﹞
重疊:必為胺基酸之內氫原子相互的關係
1.任意選取一點
2.依選取點的的中心做上下左右直線連結(以每個訊號的中心做
90度連線)
※NOESY後面一定會接TOSCY(由上圖可知)
3.可以依連結順序判斷不同訊號代表的胺基酸及其順序
PS. 第一個胺基酸的NH通常會消失,所以五個胺基酸只有四個點
※注意:第四個訊號有兩個NOESY和一個TOSCY互相重疊,所以經過兩次!!
※注意:
A. 有兩個NOESY互相重疊
B. 有兩個NOESY和一個TOSCY互相重疊
以上兩者都會經過兩次