微生物專題

實驗一 微生物的培養與分離技術

結果:

Part. 1

Part. 2

Part. 3

實驗二 細菌生長控制

目的:

探討紫外光對於細菌生長的影響

探討化學物質對於細菌生長的影響

器材:

1. 大腸桿菌(Escherichia coli )
2. 接種環
3. 酒精燈
4. 三角玻棒
5. 37°C 培養箱
6. LB固體培養基(Luria-Bertani agar)
7. Pipetman (P200、P20)
8. 化學物質: Ampicillin (10mg/ml)、蒜頭萃取液、70%酒精、10%漂白水
9. 無菌水

步驟:

Part. 1紫外光照射

1. 將 E. coli的稀釋菌液，以塗抹法分別分散於兩個LB Plate
2. 分別至太陽光下照射紫外光5分鐘及20分鐘，對照0秒不照射紫外光
3. 於37°C 培養箱內培養，觀察計算其菌落數，得知紫外光對細菌生長的影響

Part. 2化學物質感受性

1. 取0.1mL E. coli菌液，以塗抹法均勻塗於LB Plate上
2. 將鑷子過火，分別將Ampicillin原型濾紙及其他四枚濾紙貼紙LB Plate上
3. 在其餘四張濾紙上，分別加入蒜頭萃取液、70%酒精、10%漂白水及無菌水
4. 每次使用鑷子前，務必過火，各紙錠間須保持一定距離
5. 於37°C 培養箱內培養，觀察抗生素影響細菌生長情形、測量抑制圈直徑大小並記錄

結果:

Part. 1

Part. 2

實驗三 微生物的染色方法

目的:

藉微生物染色更方便觀察微生物構造

器材:

1. 大腸桿菌(Escherichia coli )
2. 酒精燈
3. 37°C 培養箱
4. Pipetman (P20)
5. 光學顯微鏡
6. 接種環
7. 鑷子
8. 無菌蒸餾水
9. 95%酒精
10. 鏡油
11. 2% Gram's 結晶紫染劑
12. Gram's Iodine
13. 0.5% 沙番紅 (Safranin)

步驟:

• 熱固定法

1. 在乾淨玻片中央置入5μL 無菌水，以tip輕沾培養基上的E. coli菌落，與無菌水均勻混合
2. 在酒精燈上加熱至一層白色、半透明的膜狀物

Part. 1

Part. 2

Part. 3

結果:

Part. 1

Part. 2

Part. 3