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實驗目的
實驗目的
√ 學習如何操作並培養細菌的基礎方法
√ 因微生物在自然界中種類繁多，我們要學會如何分離並培養較單純種類的微生物種
實驗材料與設備
實驗材料與設備
(一)菌種 :
(一)菌種 :
大腸桿菌(Escherichia coli )
(二)器材 :
(二)器材 :
√ 接種環(loop)
√ 酒精燈、70%酒精
√ 三角玻璃棒、燒杯
√ 微量吸管(Pipetman)
(三)試劑與培養基
(三)試劑與培養基
√ 95%酒精
√ 37°C培養箱
√ LB 固體培養基(Luria-Bertani agar)
√ LB 培養液(Luria-Bertani broth)
接種環
三角玻棒
實驗方法與步驟
實驗方法與步驟
(一)細菌接種法
(一)細菌接種法
√ 菌落懸浮法
√ 菌落懸浮法
1.取出大腸桿菌單一菌落(single colony)，放置於LB培養液中
2.均勻混合
3.置於37°C培養箱內培養，隔日進行觀察生長情形。
√ 塗抹法
√ 塗抹法
1.用微量吸管吸取0.1 ml大腸桿菌菌液，並滴入LB agar plate上
2.將三角玻璃棒置於95%酒精燒杯中，然後在酒精燈上過火
3.冷卻玻棒後，持玻棒在LB agar plate上塗均勻，使得菌液完全分布。
(二)細菌分離與純培養區劃線法
(二)細菌分離與純培養區劃線法
√ 劃線法
√ 劃線法
- 將滅菌接種環挑取大腸桿菌單一菌落，於LB agar plate上沿平行線將菌落劃開，為第一區。
- 將接種環燒紅殺死沾有的細菌，冷卻後再劃過第一區，沾取部分菌落，也以平行線劃開，為第二區。
- 再依同方法由第二區劃出第三區。
- 在劃最後一區時，線條應拉開分布較疏散，經隔夜培養後，可得分散的單一菌落。
如下圖 :
實驗結果
實驗結果
菌落懸浮法 :
菌落懸浮法 :
塗抹法：
塗抹法：
劃線法：
劃線法：
心得
心得
這個專題助教一個一個步驟慢慢的帶著我們認識並了解以上三種的培養法。我們先在練習的agar plate上使用接種環、三角玻璃棒操作。實際在真正的plate操作時，難易度對於新手來說真的不容易，但在多次的失誤後，最後我們仍然劃出了很不錯的菌落。
參考文獻
參考文獻
http://www.taiwanlab.com.tw/protocol/show.asp?id=4464
https://zh.wikipedia.org/wiki/%E5%88%92%E7%BA%BF%E6%B3%95
https://www.google.com.tw/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&source=images&cd=&cad=rja&uact=8&ved=0ahUKEwiUqqyt1fTUAhUFkJQKHUKECyYQjhwIBQ&url=http%3A%2F%2Fhz-xin.com%2Ft-1368329080437135059.html&psig=AFQjCNHEslSPiq-Rqs5CBxv5AL0-7a8xZg&ust=1499430836916511
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