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實驗目的
實驗目的
√ 測定養菌時外在環境對細菌生長的影響
√ 了解如何利用物理方法與化學藥劑抑制細菌生長
操縱變因
操縱變因
紫外光(陽光)照射時間:
紫外光(陽光)照射時間:
√ 5 min
√ 20 min
化學藥劑:
化學藥劑:
√ Ampicillin(10mg/ml)
√ 蒜頭萃取液體
√ 70%酒精
√ 漂白水(10%)
√ 無菌水
實驗材料與設備
實驗材料與設備
(一)大腸桿菌(E.coli)
(一)大腸桿菌(E.coli)
(二)設備
(二)設備
√ 酒精燈
√ 三角玻棒
√ 37℃ 培養箱
√鎳子
√圓形紙錠
√化學藥劑
(三)試劑與培養基
(三)試劑與培養基
LB plate*3
實驗方法與步驟
實驗方法與步驟
(一)紫外線照射實驗
(一)紫外線照射實驗
1.準備大腸桿菌的稀釋菌液，取兩個LB plate
2.取出菌液0.1ml，均勻分布於LB plate(塗抹法)
3.將塗好菌之LB plate，至於太陽光或無菌操作台之紫外光下，並將蓋子打開
4.以太陽光照射，分別作用5分鐘與20分鐘，對照組則不照射紫外光
5.將各培養皿置於37℃培養，隔天觀察並計算菌落數，而知紫外光對細菌生長的影響
(二) 化學物質感受性實驗
(二) 化學物質感受性實驗
1. 取大腸桿菌培養液一管
2. 取一LB plate，底部標定五種藥劑的位置
3. 取0.1ml的培養菌液，並以三角玻棒消毒後均勻塗抹
4. 將鑷子消毒後夾取Ampicillin紙錠貼上LB plate
5. 夾取四片圓型濾紙分別貼在前述之四個標定位置，並分別在濾紙上滴入待測物及無菌水
6. 以37度隔夜培養後觀察細菌生長情形，測量抑菌圈的直徑大小
實驗結果
實驗結果
(一)紫外光照射
(一)紫外光照射
1.菌落生長情形
√ 0 min:分散、點狀
√ 5 min:只有極小的菌落、幾乎看不見
√ 20 min:有兩個大點，應為汙染；只有極小的菌落、幾乎看不見
2.菌落數
√ 0 min: 46個
√ 5 min: 0個
√ 20 min: 0個
(二)抗生素與市售消毒產品感受性試驗
(二)抗生素與市售消毒產品感受性試驗
1.抑菌圈大小
√ Ampicillin(10 mg/ml): 26 mm
√ 蒜頭萃取液體: 15 mm
√ 70%酒精: 0 mm
√ 漂白水(10%): 10 mm
√ 無菌水: 0 mm
紫外光照射
紫外光照射
無紫外光照射
紫外光照射5min
紫外光照射20min
抗生素與市售消毒產品感受性試驗
抗生素與市售消毒產品感受性試驗
註:
- G: 大蒜
- Al: 70%酒精
- H2O: 無菌水
- 白: 漂白水
- 抗: Ampicillin(10mg/ml)
討論
討論
1. 紫外光照射
1. 紫外光照射
根據我們這組得到的成果，紫外線照射20分鐘的agar plate 中所出現的菌落數比紫外線照射5分鐘的agar plate 少。然而原本預計的結果應是20分鐘照射後的效果較好，推測可能因為實驗時沒有蓋子的保護，導致空氣中的細菌污染到agar plate，使最後成果判斷錯誤。
2. 化學物質感受性實驗
2. 化學物質感受性實驗
透過教授的提點，做完實驗後才知道實驗時應該注意什麼。最重要的一點是，要把菌體均勻且充份的圖在培養基上，此可視為一控制變因，抑菌溶液的結果才會為最精準且最為圓形。抗生素的抑菌直徑為最大，蒜頭萃取液為其次，而酒精測不出抑菌圈。
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