微生物實驗

菌落懸浮法

• 以接種環取出大腸桿菌之單一菌落，置於LB培養液中，須完全打入培養液中，並均勻混合。

塗抹法

細菌的分離與純培養分區化線法

• 用接種環以酒精燈來燒紅殺菌，在培養基空白處冷卻後，沾取菌落劃開(畫平行線)在培養基上，此即第一區，在經過第二次的殺菌與冷卻後，用第一區畫出的菌落來畫出第二區(如圖圈圈處)，接下來從附上述步驟畫出第三區。
• 第三區的範圍較第一及第二區大上很多。
• 第三區畫的線條盡量要拉開，不可太過密集，如此在經過隔夜培養後，即可得到分散之單一菌落。

紫外光照射實驗

將稀釋的大腸桿菌液塗抹於LBplate上(共三個)，其中兩盤置於陽光下分別作用5和20分鐘，對照組則不照太陽。最後則置於37度的環境下培養，隔日觀察。

結果

0分鐘對照組 菌落數:48

5分鐘 菌落數:7

20分鐘 菌落數:3

化學物質感受性實驗

取0.1毫升菌液塗抹於LBplate上，鑷子過火消毒後，夾取Ampicillin圓形濾紙貼在LBplate上。再夾取4片無菌圓形紙錠貼在LBplate上(各紙錠要保持一錠的距離)，最後再分別將待測物(酒精、蒜頭萃取液、漂白水、無菌水(對照))滴加在各紙錠上，隔夜培養後觀察抗生素抑制大腸桿菌生長的情形，測量抑制圈並記錄。

結果

微生物的染色方法

簡單染色

1. 使用熱固定法固定大腸桿菌於玻片上
2. 使用Crystal violet染劑滴2-3滴於玻片上，時間1分鐘
3. 在染槽上用蒸餾水洗滌瓶將多餘的染劑沖掉
4. 蓋上蓋玻片，使用顯微鏡觀察(100X油鏡)菌體的型態與顏色並拍照

負染色

1. 取NIGROSIN染劑於玻片邊緣
2. 用tip沾取一點E.coli於染劑中均勻混合且不用熱固定
3. 用另一片乾淨的玻片將染劑與菌體混合並蓋上。

革蘭氏染色

1. 將熱固定過之E.coli玻片和S.A以2%Gram Crystal Violet染技滴於載玻片上菌體，作用一分鐘，再用蒸餾水瓶沖洗。
2. 加入媒染液(碘液)，作用一分鐘後再用蒸餾水沖洗
3. 以95%酒精進行脫色作用(手斜拿玻片，酒精從上方沖洗直到流出的酒精呈無色)
4. 加入沙番紅Safranin繼續作用三分鐘，用水沖洗，最後用拭鏡紙奢稍微擦乾即可拿到顯微鏡下觀察。

心得

這個實驗十分考驗細心度，施力要合度，欲速則不達，當初練習的時候感覺十分的簡單，但是一到了正式實驗的時候一不小心就把洋菜膠畫破了，所以在這個實驗中我們第一個學到的就是細心。