Risultati del progetto
WP1: Campionamenti
Coordinatore: Laura Zucconi
Partecipanti: Sara Magrini, Giuseppe Fabrini, Fabiana Canini, Ana Alonso Simón, Ilaria Panero, Giulia Crocenzi, Sara Superchi, Eleonora Fiorucci, Beatrice Di Maio e Daniele Vela
Nel mese di maggio 2021 sono stati effettuati sopralluoghi lungo la costa settentrionale del Lazio per la selezione delle aree di progetto: Saline di Tarquinia e Sant'Agostino (Tarquinia, Viterbo) e Santa Severa (Santa Marinella, Roma).
Altre 5 località sono state poi individuate nel 2022: Torre Flavia e Ladispoli (Roma), Lido dei Pini (Anzio, Roma), Sabaudia (Latina) e Torre Olevola (San Felice Circeo, Latina).
Raccolta di piante di Carpobrotus edulis e Carpobrotus acinaciformis.
Nel mese di giugno 2021 sono iniziati i campionamenti nei 3 siti selezionati dove sono state raccolte piante delle 2 specie di Carpobrotus per la preparazione di estratti fogliari.
Maggio 2021 - Carpobrotus edulis presso Sant'Agostino, Tarquinia (Viterbo)
Maggio 2021 - Carpobrotus acinaciformis presso le Saline di Tarquinia (Viterbo)
Giugno 2021 - Raccolta di piante di Carpobrotus edulis a Sant'Agostino (Viterbo), per un totale di oltre 10 kg
Giugno 2021 - Raccolta di piante di Carpobrotus acinaciformis presso le Saline (Viterbo), per un totale di ca. 9 kg
Raccolta di campioni di suolo nei siti di progetto
Nel mese di giugno 2021 sono stati raccolti un totale di 134 campioni di sabbia (rizosfera associata alle radici delle piante dunali), per le analisi del suolo e per lo studio delle comunità microbiche presenti. I campioni sono stati prelevati in triplicato nei 3 siti di progetto, sia in aree con vegetazione naturale che con diffusa presenza di Carpobrotus.
Giugno 2021 - Raccolta di campioni di suolo intorno alle radici di Pancratium maritimum presso le Saline (Viterbo)
Giugno 2021 - Raccolta di campioni di suolo intorno alle radici di Cakile maritima a Sant'Agostino (Viterbo)
Giugno 2021 - Raccolta di campioni di suolo intorno alle radici di Plantago coronopus a Sant'Agostino (Viterbo)
Giugno 2021 - Raccolta di campioni di suolo intorno alle radici di Anthemis maritima a Santa Severa (Roma)
Raccolta di semi di specie dunali nei siti di progetto
Nel periodo maggio/ottobre 2021 sono state raccolte 25 accessioni di semi di 12 specie dunali.
Altri campionamenti sono stati effettuati nel periodo giugno-agosto 2022 a Torre Flavia, Ladispoli e Anzio (Roma) e a Sabaudia e Torre Olevola-San Felice Circeo (Latina).
Complessivamente, negli 8 siti selezionati sono state raccolte 65 accessioni di semi di 16 specie dunali.
Maggio 2021 - Semi di Silene canescens (Caryophyllaceae) raccolti a Sant'Agostino (Viterbo)
Maggio 2021 - Frutti di Cakile maritima (Brassicaceae) raccolti a Santa Severa (Roma)
Luglio 2021 - Semi di Matthiola sinuata (Brassicaceae) raccolti presso loc. Saline (Viterbo)
Luglio 2021 - Semi di Medicago marina (Fabaceae) raccolti presso loc. Saline (Viterbo)
Settembre 2021 - Acheni di Anthemis maritima (Asteraceae) raccolti presso le Saline (Viterbo)
Settembre 2021 - Acheni di Centaurea sphaerocephala (Asteraceae) raccolti a Sant'Agostino (Viterbo)
Ottobre 2021 - Semi di Pancratium maritimum (Amaryllidaceae) raccolti a Santa Severa (Roma)
Maggio 2021/Novembre 2022 - Sono state raccolte 65 accessioni di semi di 12 specie per il progetto RIVALSA
WP2: Preparazione degli estratti di Carpobrotus
Coordinatore: Sara Magrini
Partecipanti: Ana Alonso Simón, Beatrice Di Maio e Daniele Vela
Luglio 2021 - Pulizia e preparazione delle foglie di Carpobrotus acinaciformis per l'essiccazione: 6 kg!
Luglio 2021 - Foglie essiccate in stufa di Carpobrotus acinaciformis per la preparazione degli estratti: 730 g
Settembre 2021 - Polverizzazione delle foglie di Carpobrotus acinaciformis
Da Settembre 2021 - Preparazione degli estratti di foglie di Carpobrotus acinaciformis e C. edulis
Estratti in etanolo 70% di Carpobrotus edulis e C. acinaciformis
Liofilizzazione degli estratti in acqua di Carpobrotus edulis e C. acinaciformis
Sterilizzazione degli estratti di Carpobrotus acinaciformis e C. edulis, tramite sistema di filtrazione sotto vuoto con membrana da 0,2 µm
Estratti in acqua di Carpobrotus edulis e C. acinaciformis dopo la sterilizzazione
WP3: Analisi microbiologiche
Coordinatore: Laura Zucconi
Partecipanti: Fabiana Canini
Luglio 2021 - Semina dei campioni di suolo in piastre con terreno di coltura per la crescita di funghi
Luglio 2021 - Crescita dei ceppi fungini da isolare
Luglio 2021 - Ceppi fungini isolati per i test di resistenza
Ottobre 2022- Ceppi fungini selezionati per i test di resistenza
WP4: Test sulla germinazione dei semi delle piante dunali
Coordinatore: Sara Magrini
Partecipanti: Ana Alonso Simón, Sara Superchi, Eleonora Fiorucci, Giulia Crocenzi, Beatrice Di Maio e Daniele Vela
Test di germinazione dei semi e vitalità delle plantule in presenza di estratti di Carpobrotus (task 4.1)
Dal mese di novembre 2021 sono stati condotti test di germinazione di semi di 10 specie dunali, in presenza di concentrazioni incrementali di estratti in acqua e in etanolo di Carpobrotus acinaciformis e C. edulis. Nello specifico:
semi di Salsola squarrosa subsp. controversa (Amaranthaceae), Cakile maritima e Matthiola sinuata (Brassicaceae) sono stati testati a 8 temperature costanti da 5 a 40°C, sia alla luce che al buio, per definirne le condizioni ottimali per la germinazione e poi testati in presenza degli estratti;
semi di Anthemis maritima e Centaurea sphaerocephala (Asteraceae), Pancratium maritimum (Amaryllidaceae), Medicago marina (Fabaceae), Plantago coronopus (Plantaginaceae), Silene canescens (Caryophyllaceae), Daucus gingidium (Apiaceae), Malcolmia littorea, Cakile maritima e Matthiola sinuata (Brassicaceae) raccolti in aree invase da Carpobrotus acinaciformis e C. edulis e in dune naturali, sono stati testati in condizioni ottimali di temperatura e fotoperiodo, in presenza di estratti delle 2 specie di Carpobrotus.
Luglio/Novembre 2021 - Pulizia e preparazione dei semi per i test di germinazione
Dal mese di novembre 2021 sono iniziati i test di germinazione dei semi raccolti nei siti di progetto
Novembre 2021 - Test preliminari di germinazione (T=10-40°C) di semi di Salsola squarrosa subsp. controversa raccolti a Santa Severa (Roma)
Marzo/Aprile 2022 - Test preliminari di germinazione (T=5-40°C) di semi di Cakile maritima raccolti presso le Saline di Tarquinia (Viterbo)
Febbraio/Marzo 2022 - Test di germinazione di acheni di Anthemis maritima (Saline di Tarquinia, Viterbo), con estratto in acqua di C. acinaciformis (T=25°C, luce/buio)
Maggio 2022 - Test di germinazione di semi di Pancratium maritimum (Saline di Tarquinia, Viterbo), con estratto in acqua di C. acinaciformis (T=20°C, buio)
Maggio 2022 - Confronto fra la germinazione di semi di Pancratium maritimum nel controllo (in alto) e alla concentrazione massima di estratto in acqua
Ottobre 2022 - Confronto fra la germinazione di semi di Malcolmia littorea a diverse concentrazioni di estratto in acqua
Test di germinazione dei semi e di vitalità delle plantule in vitro in presenza di estratti di Carpobrotus e del consorzio fungino (task 4.2)
Dal mese di settembre 2022 sono stati condotti test di germinazione di semi di 3 specie dunali, Pancratium maritimum (Amaryllidaceae), Anthemis maritima e Centaurea sphaerocephala (Asteraceae), raccolti in aree invase da Carpobrotus acinaciformis o C. edulis in piastre Petri con terreno agarizzato, in presenza sia degli estratti delle 2 specie di Carpobrotus che di 3 ceppi fungini isolati dal suolo, per testare la loro eventuale capacità di stimolare germinazione e crescita di semi di.
WP5: Test sulle piante per la validazione del prodotto
Coordinatore: Giuseppe Fabrini
Partecipanti: Ilaria Panero, Alessandro Di Cocco, Francesco Buttarazzi, Beatrice Di Maio, Daniele Vela, Fabiana Canini, Sara Magrini
Nel periodo febbraio-giugno 2023 sono state condotte prove di germinazione e crescita di Anthemis maritima, Centaurea sphaerocephala, Malcolmia littorea, Matthiola sinuata, Medicago marina, Plantago coronopus e Pancratium maritimum in presenza di estratti delle 2 specie di Carpobrotus e di 3 ceppi fungini isolati dal suolo.
Nelle foto sopra, prove di Matthiola sinuata: a sx: controlli (acqua, estratto di C. acinaciformis e estratto di C. edulis); al centro: estratto di C. acinaciformis + 3 funghi + mix dei funghi; a destra: estratto di C. edulis + 3 funghi + mix dei funghi.
Risulta evidente la capacità allelopatica dei 2 estratti, rispetto al controllo in acqua. Inoltre, i ceppi fungini aggiunti insieme agli estratti sembrano facilitare la germinazione solo con l'estratto di C. acinaciformis (al centro).