藍忠昱 老師
實驗步驟
染色前的準備工作:
1.塗片:在乾淨的玻片上滴無菌水,再挑少量菌落來均勻抹開來
2.熱固定:用鑷子夾玻片,來回移動數次在酒精燈上烤直到水乾掉(一定要來回移動,不然可能過熱炸開)
染色的四大步驟:
1.結晶紫:讓它上10秒鐘,所有的細菌(不論陽性或陰性都會被染成深紫色)
2.滴加格蘭氏碘液,碘會與結晶紫結合,在細胞內形成較大的「結晶紫-碘複合物」
3.用酒精把染劑洗掉,這時革蘭氏陰性菌細胞壁上的碘液會被洗掉
4.滴加番紅,這能讓剛才被脫成無色的革蘭氏陰性菌染上紅色,而原本維持紫色的陽性菌則不受影響
注意每個步驟後都要用水把染劑洗掉,注意水不要太大(怕把細菌衝下來),也不要直接對著菌落沖
這是陰性細菌和陽性細菌混合的照片,可以從圖片中明顯看出有一些深紫色的陽性細菌(枯草桿菌),以及粉色的陰性細菌(大腸桿菌)
這是簡單染色的顯微鏡圖,步驟較簡單,但無法像格蘭氏染色法一樣分辨陽性菌或陰性菌
這是陽性的枯草桿菌,可以明顯看出它比右圖的陰性菌深很多,呈現黑紫色
這是陰性的大腸桿菌,可以明顯看出它比左圖的陽性菌淺很多,呈現淺粉色