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課堂提問
課堂提問
Q1:如何培養耐高溫菌 ?
Q1:如何培養耐高溫菌 ?
要培養耐高溫菌，選擇適當的培養基如含葡萄糖的液態或固體培養基，並在50°C以上的溫度下培養。調整培養基的pH值和營養成分以支持生長。定期監測菌落的生長情況，採用微生物學方法鑑定和純化耐高溫菌株。🦏
Q2 :酵母菌最多有幾個芽痕 ?
Q2 :酵母菌最多有幾個芽痕 ?
酵母菌通常最多可以有四個芽痕。這些芽痕是酵母菌生長和繁殖的方式之一，它們可以在適當的環境下分裂成新的個體。
酵母菌通常最多可以有四個芽痕。這些芽痕是酵母菌生長和繁殖的方式之一，它們可以在適當的環境下分裂成新的個體。
Q3:幽門桿菌如何生存於酸性環境?
Q3:幽門桿菌如何生存於酸性環境?
幽門桿菌擁有一種稱為尿素酶（urease）的酵素。這種酵素能夠將主機胃黏膜分泌的尿素轉化為氨和二氧化碳。氨能夠中和周圍的酸性環境，從而保護細菌不受胃酸的侵害。這一過程同時產生了二氧化碳，這可能有助於幽門桿菌在胃內的定位。
Q4:生產益生菌的注意事項
Q4:生產益生菌的注意事項
為了保護益生菌免受胃酸的影響，增加到達腸道的機會，常見方法有三種：
1.膠囊形式：益生菌膠囊通常由天然或者合成的材料製成，可以提供足夠的保護，使益生菌在通過胃酸的過程中能夠保持活性。這些膠囊一般設計成可以在胃中溶解或者開放，讓內部的益生菌在更接近腸道的位置被釋放。
2.微膠囊化技術：這種技術將益生菌包裝在微小的膠囊或者穩定的外層中，能夠提供更持久的保護。微膠囊可以由不同的材料製成，如澱粉、明膠或者特殊的聚合物，這些材料能夠在胃酸的高酸度環境中保護益生菌免受損害，直到達到腸道。
3.保護性塗層：有些益生菌產品可能採用特殊的保護性塗層，這些塗層能夠在一定程度上抵抗胃酸的侵襲，保護內部的益生菌不被破壞，從而提高到達腸道的可能性。
Q5: E.coli 的"E"代表什麼?
Q5: E.coli 的"E"代表什麼?
E.coli 中的 E 代表 Escherichia，是屬名的一部分
微生物學實驗
微生物學實驗
實驗一:微生物染色法
實驗一:微生物染色法
簡單染色法 Simple Staining
簡單染色法 Simple Staining
使用的菌種為 E.coli
先用熱固定法把菌體固定在載玻片上
使用染劑 Crystal violet (結晶紫)染色60秒
染色完成以 ddH2O 洗去過多的染劑
染劑帶正電來觀察菌種的型態與特性
格蘭氏染色法 Gram's Staining
格蘭氏染色法 Gram's Staining
先將三種區域以熱固定法固定在載玻片上
接下來分為四種步驟
初染：使用的染劑為結晶紫
媒染：使用的染劑為碘液
去色：使用95%的酒精(EtOH)脫色
回染：使用的染劑為番紅
此四步驟中間過程皆需要使用ddH2O清洗10秒
<---上圖為G+(枯草桿菌)，下圖為G-(E.coli)
下圖為染劑
實驗二：三種微生物培養方式
實驗二：三種微生物培養方式
1.劃線法(streak-plate method)
器材:
loop、培養皿(含洋菜膠)、E.coli 菌落、酒精燈
實驗步驟:
(1) 將loop以酒精燈加熱至鉻鐵絲端呈現紅色(消毒)
(2) 將加熱消毒後的loop靜置5~10秒冷卻，並刮取些許
E.coli 菌叢
(3) 將loop在培養皿上以"劃閃電"的方式將E.coli轉移至
培養皿
(4) 靜置於保溫箱16小時左右
2.塗抹法(spread-plate method)
器材:
培養皿(含洋菜膠)、E.coli 稀釋液、酒精燈、75%EtOH、 三角玻棒、pipetman
實驗步驟:
(1) 將10μL的E.coli稀釋液加入培養皿
(2) 三角玻棒浸入75% EtOH後，以酒精燈烤乾，並靜置 5~10秒冷卻
(3) 以三角玻棒將E.coli稀釋液均勻塗抹於培養皿上
(4) 靜置於保溫箱16小時左右
3.液態培養法(broth method)
器材:
LB broth、P200tip、E.coli 菌落
實驗步驟:
(1) 以P200的tip沾取些許E.coli菌落
(2) 將前述tip放進LB broth 靜置16小時
實驗三：外部條件對菌落生長之影響
實驗三：外部條件對菌落生長之影響
1.紫外光照射(分為5、20分鐘)
2.Ampicillin(10mg/ml)
3.蒜頭萃取液
4.70%EtOH
5.10%漂白水
6.漱口水
7.無菌水
實驗四:坊間手搖飲料含菌量檢測
實驗四:坊間手搖飲料含菌量檢測
實驗步驟:
(1)準備15支裝有lactose broth的試管，並平分成三組
(2)用tip在前五支中裝入10ml的飲料
(3)用tip在中間五支中裝入1ml的飲料
(4)用tip在後五支中裝入0.1ml的飲料
(5)等待約16hr
(6)觀察各組中有幾管在冒泡泡(positive results)
(7)查表找出飲品中可能含有的細菌量
實驗結果
實驗結果
塗抹法
畫線法
液態培養法
抑菌圈
心得
心得
微生物染色法是生物學中常用的技術，用於染色並觀察微生物細胞的結構和特徵。革蘭氏染色是最常見的染色方法，能區分細菌的細胞壁類型（革蘭陽性和革蘭陰性）。其他染色方法如抗酸染色用於檢測酸忍受菌（如結核分枝桿菌）。這些染色技術不僅在臨床診斷和病原鑑定中有重要應用，還在環境監測和食品安全領域發揮作用。然而，染色方法的效果受到微生物細胞結構的影響，並且需要準確的操作技巧和染色劑的選擇。隨著技術的進步，染色法在解析微生物多樣性和生態角色方面的應用將持續擴展，為微生物學研究提供重要的工具。
資料來源🐘
資料來源🐘
https://www.newton.com.tw/wiki/MS%E5%9F%B9%E9%A4%8A%E5%9F%BA
https://yenbiology.weebly.com/3346939636.html
https://principlemicrobiology.blogspot.com/2008/04/spread-plate-method.html
https://scitechvista.nat.gov.tw/Article/C000003/detail?ID=1ea4897a-18c2-49e3-a5d6-12ef762928af
https://www.harpersbazaar.com/tw/beauty/dietary-therapy/g45729939/probiotics-definition-advantages/
https://en.wikipedia.org/wiki/Escherichia_coli
https://bioclass.site.nthu.edu.tw/p/405-1421-251779,c8117.php?Lang=zh-tw
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