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核磁共振儀
Nuclear Magnetic Resonance(NMR)
(上圖是我們拜訪蘇士哲教授的實驗室時所拍攝的喔)
摘要
如今人類生命科學(life sciences)與生物科技(Biological Technology)的卓越發展,其中一部份歸功於進步的蛋白質(protein)定序與結構分析技術,而今天我們的課程就是有關於NMR核磁共振儀的原理與應用。
(上圖是我們拜訪蘇士哲教授的實驗室時所拍攝的喔)
原理
具有奇數原子數(或質量)的原子核會有核自旋,才會被NMR 所觀察到。一質子的原子數等於1 ,其自旋量子數(Spin quantum number) 不為零,因此就會像一個微小磁鐵,具有磁場(magnetic field)。核磁共振儀能分析出該蛋白質結構中各個氫原子的磁場,進而繪出一維(上方最左邊的圖)、二維(標題的圖)、三維的圖譜(下方的圖),並由電腦分析數據,轉換成蛋白質的結構。
各個氫原子會因為相鍵結電子的電負度相異(如:N-H和C-H),甚至是兩氫原子間產生的氫鍵等等,造成化學環境的不同,而影響外層電子雲厚度,使原子核的磁場屏蔽效應消長,造就了每個氫原子有不同的磁場強度,就像是各自的"身分識別證"。
當小磁鐵置於一個大磁場中,它本身的磁力線可順著大磁場的磁力線方向,也可以逆著磁力線方向。前者為能階較低的質子,稱之為
α- spin,後者則稱為β-spin。
ΔΕ=γh H0/2π
ΔΕ=h ν
從α- spin能階躍遷至β- spin能階 所需吸收能量,綜合此兩式可得到一式:
ν=γH0/2π
此為NMR 所必須偵測的頻率,單位: Hz,且適用於沒有被電子雲所遮蔽的情況。
在二維系統中,我們可以結合兩套圖譜:2D TOCSY(測量鍵結關係)與2D NOESY(測量空間關係)得出蛋白質中各個胺基酸的排列順序,再與3D圖譜結合最後得到蛋白質的立體結構。
教授出了幾個題目,讓我們試著從TOCSY和NOESY圖回推蛋白質的結構。以下有一題難題,您會畫嗎?(已畫線的為提示)
解答(綠線部分為解答):
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