Procedimento: A amostra (3-4 gotas ou um pequeno cristal) é tratada com 3-4 gotas do Reagente Cobaltinitro 5% (este reagente deve ser preparado no momento do ensaio: 0,5 g de cobalto-hexanitrito de sódio dissolvidos em 10 ml de água destilada) e uma gota de ácido acético glacial.  O tubo é aquecido em banho-maria por 2-3 minutos. A mudança de cor do amarelo escuro para o castanho é uma indicação de ensaio positivo; a visualização do quelato pode ficar mais fácil se se adicionar 2-3 gotas de Clorofórmio ao meio, o qual, ao extrair o complexo, toa a cor castanha. Este ensaio deve ser feito acompanhado simultaneamente do ensaio em branco que, pelo aquecimento, passa da cor amarela para a cor de rosa clara.  (COSTA NETO, 2004, p. 516)