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旧作シリーズ（バイオハザード0～3）ではラクーンシティが舞台で、バイオハザード1での洋館事件が初作品。ラクーンで奇妙な連続猟奇殺人事件が頻発しており調査中に乗り出した特殊部隊であるスターズ隊員。
草原でゾンビ化した犬（ケルベロス）に襲われ、クリス、バリー、ウェスカー、ジル等のスターズ隊員達はからくもながらとある洋館に辿りつく。そこで想像を絶する悲劇が待ち受けていようとは夢にも思わなかったであろう。
洋館内は人間がゾンビ化、ケルベロス、あらゆる生物がクリーチャーと化してモンスターの巣窟。もはや人間の住める環境ではなくなっている。
果たしてスターズ隊員達はこの地獄の環境から脱出することができるのであろうか。
ラクーンシティ全体ではTウイルスに汚染されており、人間や動物などほとんどの生物はゾンビ化。
洋館事件の生き残りであるクリスの妹クレア、新米警官のレオンが本作の主人公。クレアは幼少期からクリスに武器の手ほどきを受けており、ロケットランチャーのような重火器をも使いこなす頼もしい女性。
レオンは新米警官で荒削りが目立つが、正義感は人一倍強い。