一、目的與原理

1. 學習如何將細菌接種於各種培養基上，並學會分離及純化細菌的方法。

2. 自然界中無論空氣、水、土壤及動植物體，都有大量微生物存在。而土壤細菌是土壤微生物中務亮、種類最多、分布最廣的。因此，我們可以利用基礎培養基將土壤的微生物分離出來進而觀察。

（一）細菌之接種方法依所使用培養基的種類之不同，接種細菌的方法也不同。

（二）細菌分離方法：

1. 分區劃線法 (Streaking Method)：快速分離細菌的方法，可將細菌菌落分散於營養plate上。

2. 稀釋塗抹法 (Dilution Spreading Method)：將混合菌液稀釋，在均勻塗抹於營養plate上。

3. 倒皿法 (Pouring Plate Method)：將稀釋之菌液與加熱溶解之培養基混合後，直接傾倒於plate上。

二、材料與設備

（一）菌種：大腸桿菌 (E.Coli)

（二）器材

1. 接種環

2. 酒精燈、70%酒精

3. 三角玻棒、燒杯

（三）試劑與培養基

1. 95%酒精

2. 37˚c培養箱

3. LB培養基(Luria-Bertani agar)*3

4. LB培養液(Luria-Bertani broth)*1

三、方法與步驟

四、結果

一、目的與原理

在養料足夠與生長條件適當下，細菌會以一定的速度不斷地生長。

（一）溫度：微生物生長的溫度在-5˚c~80˚c之間。

（二）紫外光：波長265nm是微生物DNA最易吸收的波長。

（三）含氧量：微生物培養所需氣體包括氧氣與二氧化碳。

（四）化學物質：會影響細菌生長，甚至會破壞細菌結構或干擾其代謝反應。

二、材料與設備

（一）大腸桿菌 (E. coli)

（二）設備

1. 酒精燈

2. 三角玻棒

3. 37˚c培養箱

4. 鑷子、圓形紙錠

5. 化學物質：Ampicillin (10mg/ml)、蒜頭萃取液、漱口水、漂白水 (10%)

6. 無菌水

三、方法與步驟

四、結果

（一）紫外光照射實驗

大腸桿菌以不同劑量之紫外線照射，文字敘述觀察菌落生長情形，並計算菌落數。

（二）抗生素或市售消毒產品感受性試驗

抑菌圈測量：

(1) 抑菌圈直徑小於12mm：無抗生素活性。

(2) 抑菌圈直徑介於12-16mm：具中度抗生素活性。

(3) 抑菌圈直徑大於16mm：具高度抗生素活性。

一、目的與原理

二、材料與設備

（一）菌種

大腸桿菌 E.coli、枯草桿菌 Bacillus

（二）設備

1. 載玻片

2. 光學顯微鏡、拭鏡紙

3. 接種環

4. 酒精燈

5. 鑷子

（三）試劑與培養基

1. 無菌蒸餾水

2. 95%酒精

3. 鏡油

4. 2% Gram's結晶紫染劑

5. Gram's Iodine

6. 0.5% 沙番紅 Safranin

革蘭氏染色法