Métodos de Sedimentação

Profa. Michelli Gouveia Ramos

Introdução

EPF: Método de sedimentação espontânea de ovos pesados de helmintos pelo MÉTODO DE HOFFMAN, PONS E JANER OU DE LUTZ

A técnica de Hoffman, Pons e Janer ou Lutz ou método de sedimentação espontânea, consiste basicamente na mistura das fezes com água, sua filtração por uma gaze cirúrgica (ou parasitofiltro) e manutenção em repouso, formando uma consistente sedimentação dos restos fecais ao fundo do cálice.

Uma alíquota do sedimento é pipetada sobre lâmina, é feito um esfregaço e observado em microscópio. Este método detecta a presença de ovos nas fezes, principalmente os pesados, após coloração com lugol.

Diversas variações são realizadas nessa técnica a fim de promover a visualização de mais formas evolutivas, dada a praticidade da técnica. Após 24 horas de sedimentação, cistos de protozoários e larvas de helmintos também podem ser encontrados com maior facilidade. Essa é a técnica mais utilizada rotineiramente em laboratórios clínicos.

Princípio do método: Sedimentação espontânea.
Finalidade: Pesquisa de ovos e larvas de helmintos.
Vantagens do método: Barato, fácil de ser preparado.
Desvantagens do método: Inespecífico e demorado.

Materiais e
Equipamentos

Cálice de decantação;
Peneira;
Gaze;
Água corrente ou destilada;
Espátula de madeira (tipo abaixador de língua);
Lâmina e lamínula;

Lugol;
Fezes;
Álcool;
Pipeta Pasteur;
Descarte para cálice.

POP

Análise macroscópica da amostra

São analisadas características como consistência, cor e odor.

Técnica de HOFFMAN, PONS E JANER OU DE LUTZ

Diluir 2g de fezes em 5 ml de água. Triturar bem as fezes
Filtrar em gaze dobrada em 4 diretamente em um cálice de 200mL.
Lavar os detritos retidos na gaze com água (20 mL).
Completar o volume do cálice com água.
Deixar a suspensão em repouso de 2 – 24 horas.
Após 24 horas, analisar o sobrenadante:
Caso o sobrenadante esteja turvo, descarte o sobrenadante cuidadosamente para não ressuspender o sedimento, adicionar mais água até o volume anterior e aguardar 60 minutos.
Caso o líquido esteja límpido, despreze o sobrenadante cuidadosamente, homogenize o sedimento e colete uma amostra para análise.
Os cistos e os ovos leves presentes estarão no sedimento e serão recolhidos com o auxilio de pipeta de Pasteur.
O sedimento será colocado em uma lâmina junto com uma gota de Lugol e coberta com lamínula.
Realizar a análise de pelo menos 2 lâminas.
Realizar a microscopia da lâmina imediatamente na objetiva de 10x ou 40x.
Emitir o laudo.
OBS: não deixar o cálice em repouso na bancada que tenha centrífuga.

Figura 1 - Técnica de Hoffman, a mais utilizada em laboratórios clínicos.

Fonte: https://www.gov.br/ebserh/pt-br/hospitais-universitarios/regiao-nordeste/hulw-ufpb/acesso-a-informacao/gestao-documental/pop-procedimento-operacional-padrao/2021/ulac-unidade-de-laboratorio-de-analises-clinicas/pop-ulac-022-exame-protoparasitologico.pdf/view

Para análise microscópica:

Pinga-se uma gota do sedimento na lâmina com pipeta pasteur;
Acrescenta-se uma gota de lugol;
Faz-se a homogeneização com a lamínula;
Lê-se em microscópio óptico em objetiva de 10x. Se houver suspeita da presença de parasitos deve-se confirmar a morfologia destes na objetiva de 40x.

Para facilitar seus estudos, e melhorar o entendimento da realização da técnica, assista ao vídeo que detalha todos os materiais utilizados e o passo a passo do exame. Abaixo, segue o link de acesso:

Na Prática

Verifique seu Aprendizado

1) O objetivo do exame parasitológico de fezes (EPF) é diagnosticar os parasitos intestinais do homem, por meio de pesquisa das diferentes formas parasitárias que são eliminadas nas fezes. Com relação aos métodos empregados no EPF, assinale a alternativa que representa o princípio do método correto:

a) Hoffman, Pons e Janer é baseado na sedimentação por centrifugação, permitindo a evidenciação de cistos e trofozoítos de protozoários e ovos de helmintos.

b) Willis é baseado na sedimentação espontânea, permitindo a evidenciação de cistos e oocistos de protozoários e vermes adultos.

c) Blagg (também conhecido por método de MIFC) é baseado na concentração de larvas de helmintos por migração ativa, devido ao hidrotropismo e ao termotropismo positivos.

d) Baermann-Moraes é baseado na flutuação espontânea, permitindo a evidenciação de ovos pesados.

e) Faust é baseado na centrífugo-flutuação, utilizado para a pesquisa de cistos e alguns oocistos de protozoários e, também, de ovos leves.

2) De acordo com as imagens apresentadas a seguir, referentes a Exames Parasitológicos de Fezes realizados em uma rotina de determinado laboratório de analises clínicas, nomeie as estruturas analisadas no exame: