Esta aula tem como objetivo analisar a concentração do colesterol total e suas frações (COL-HDL e COL-LDL) circulantes no organismo. A metodologia utilizada é enzimática colorimétrica com cálculo direto do colesterol total e COL-HDL e indireto do COL-LDL. Justificativa: O colesterol é o principal esterol do organismo, estando presente em todas as células como um componente estrutural das membranas e das lipoproteínas (HDL, VLDL e, principalmente, LDL). É, também, o precursor na formação dos hormônios esteroides pelas gônadas e córtex adrenal. Cerca de 70 a 75% do colesterol plasmático encontra-se na forma de éster e 25 a 30% existe como colesterol livre, entretanto a sua alta concentração é considerada fator de risco para desenvolvimento de doenças, em especial, àquelas relacionadas à obstrução da circulação sistêmica.

Os ésteres do colesterol presentes na amostra são hidrolisados pelo colesterol esterase (CHE) presente no reagente do KIT, assim, forma-se um colesterol livre que, após a oxidação pela enzima colesterol oxidase, forma o peróxido de hidrogênio, o qual, por meio de copulação oxidativa catalisada pela peroxidase (POD), produz uma quinonimina de cor vermelha. A absorbância do complexo formado, medida em 500 nm, é diretamente proporcional à concentração de colesterol da amostra. A análise do HDL é baseada nos quilomicrons, nas lipoproteínas de muita baixa densidade (VLDL), e as lipoproteínas de baixa densidade (LDL) são, quantitativamente, precipitadas com fosfotungstato e íons magnésio. Após centrifugação, o sobrenadante contém as lipoproteínas de elevada densidade (HDL) cujo colesterol é quantificado, fotometricamente, mediante as reações acopladas descritas, a seguir. A absorbância do complexo formado (vermelho), medida em 500 nm, é diretamente proporcional à concentração de colesterol HDL da amostra.