全光譜即時影像流式細胞分選儀
(Cell Sorter - BD FACSDiscover S8)

廠牌：Becton, Dickinson and Company

型號：FACSDiscover S8

配備：

• 軟體 : BD FACSChorus™ Software

• 雷射與螢光偵測器收光範圍：

  1. UV (349-nm laser) : 22 detectors, covering 365-860 nm

  2. Violet (405-nm laser) : 20 detectors, covering 410-860 nm

  3. Blue (488-nm laser) : 16 detectors, covering 495-860 nm

  4. Y/G (561-nm laser) : 12 detectors, covering 570-860 nm

  5. Red (637-nm laser) : 8 detectors, covering 645-860 nm

• 影像收光範圍

  1. Blue (488-nm laser): 3 detectors, 511-557 nm / 570-630 nm / 675.5-900.5 nm

#  螢光選擇可參考「Fluorochrome Selection Guide: BD FACSDiscover™ S8 Cell Sorter」及「線上課程」

 雙和校區生醫科技大樓五樓，共同儀器中心流式細胞核心

自行上機 

• 週一至週五，上午09:00至下午16:00。

技術人員服務 

• 週一至週五，上午09:00至12:00；下午13:30至16:00。

自行上機 

• 使用本儀器之申請流程：

1. 請至共儀中心網頁瀏覽聆聽線上原理課程

2. 通過筆試測驗

3. 累積操作

4. 通過上機考試後繳交認證紀錄表及權限申請書，待權限開通便可自行網路登記使用。

• 線上課程網站：https://tmurd.tmu.edu.tw/zh_tw/CFC0/cfctraining

• 儀器預約系統：https://rd2sys.tmu.edu.tw:8011/icweb/default.asp。

•  每次登記使用以半小時為原則，預約最長為4小時，超過4小時，請洽共儀中心。

• 數據資料請申請共儀中心線上雲端儲存系統存取備份，禁用其他存取工具，本中心不負資料保管責任。

• 使用時請維持環境整潔，並將實驗廢棄物攜回清理。

• 操作儀器時應小心使用，遇有人為損壞應負賠償責任。

• 進出儀器室必須隨手關門，以確保儀器安全。

技術人員服務 

• 申請技術人員服務者，請填寫技術人員服務申請單，待指導教授及共儀中心審核通過後，再由技術人員代為上網預約時間。

• 送測樣品注意事項：

  • 敬請於樣品上機時陪同技術人員，以利提供實驗資訊與參數的調整，進而提升實驗進行的效率與取得較佳的數據。

  • 不接受具有放射性、毒性或感染性之樣品並以進行細胞分選服務為主。

  • 技術人員收到申請單後，將與您連絡安排送樣與諮詢時間。

  • 其他送測注意事項請見送測申請單。

• 詳細請參考：全光譜即時影像流式細胞分選儀使用規範。

• 校外使用者，請直接電洽共儀中心預約。

自行上機 

• 校內收費:

  1. 一般分析實驗:450 元/小時。

  2. 無菌分選實驗:600 元/小時。

• 校外收費:

  1. 一般分析實驗:1350 元/小時。

  2. 無菌分選實驗:1800 元/小時。

技術人員服務 

• 校內收費:

  1. 一般分析實驗:900 元/小時。

  2. 無菌分選實驗:1200 元/小時。

• 校外收費:

  1. 一般分析實驗:2700 元/小時。

  2. 無菌分選實機費:3600 元/小時。

# 最低費用以半小時計

# 請確認您的樣本準備良好，若並非儀器故障導致實驗結果不良，使用者仍必須依收費標準付費。

#上機前需先進行諸多校正步驟，若要取消實驗，須在前一天來電告知；若未告知，則視同上機仍需收費。

• 請自備實驗耗材。

• 若需將細胞影像與流式數據對應呈現（查看每顆細胞的實際影像、搜尋相似形態細胞等）→ 則需要於FlowJo 分析數據時，下載安裝 CellView Lens Plugin。(CellView Lens Plugin使用教學)

• 樣品製備建議：

  1. 盡量使用新鮮樣品，減少死細胞比例。

  2. 為避免為避免噴嘴（Nozzle）堵塞，請於上機前使用 Cell Strainer 或其他適當濾網過濾樣品(常見為40–70 µm )。

  3. 建議濃度約  1×10⁶-1×10⁷ cells/mL。

  4. 若使用較易黏附聚集的細胞，可考慮加入2–5 mM EDTA 於緩衝液中置備樣品，請自行謹慎評估是否會影響實驗數據及存活率等。

  5. 若死細胞較多時，會有許多游離的 DNA，導致細胞嚴重聚集，可考慮加入 DNase I 處理以減少 DNA 造成的聚集 (若與EDTA同時使用會導致DNase I 失效)。

  6. 若分選後細胞存活率較低，可考慮於實驗前一天將收集管加入 1%BSA 或100% FBS，置於細胞培養箱中潤管過夜，分選當天將潤管液盡量倒除，再加入所需的培養液，以減少細胞黏附於管壁，提升分選後存活率。

  7. 收集管內培養液的抗生素濃度建議加入平時培養時的2倍，因收集時會使總體積上升。

§  共儀中心技術員：鄭毓仕 先生 TEL: (02) 6620-2589轉分機 15529

§  共儀中心技術員：詹智宇 先生 TEL: (02) 6620-2589轉分機 15526

Fluorochrome Selection Guide: BD FACSDiscover™ S8 Cell Sorter

BD FACSDiscover S8 Quick Reference Guide

全光譜即時影像流式細胞分選儀使用規範

全光譜即時影像流式細胞分選儀認證紀錄表

Cell Sorter - BD FACSDiscover S8 Authentication Record