Katalaseøvelse
Formål:
At undersøge katalases spaltning af H2O2
Teori:
Katalase er en enzym, der findes i de fleste levende organismer. Det katalyserer omdannelsen af hydrogenperoxid (H2O2, brintoverilte) til O2 og H2O.
2 H2O2 -> 2H2O + O2
Cellerne har brug for katalase fordi H2O2 er stærkt reaktivt - det vil sige det reagerer nemt med andre stoffer (hvilket også gør det stærkt ætsende, så lad være med at få det på jer selv!)
Når et stof er rigtig godt til at reagere med andre stoffer betyder det også at det kan reagere med de vigtige molekyler i cellen - f.eks. proteiner og DNA.
Stoffer der reagerer med DNA kaldes også mutagener fordi de fremkalder mutationer (ændringer i arvemassen, DNA).
H2O2 opstår naturligt i cellen under stofskifteprocesserne, men hvis cellerne mangler et enzym til at nedbryde H2O2 vil det ødelægge cellen indefra og hos store organismer som os, også kunne medføre kræft.
Enzymet katalase er meget effektivt - det kan lave op mod 40 millioner reaktioner pr sekund ved den optimale temperatur, der ligger omkring 45°C.
Katalase findes i alle dele af kroppen, men i særligt høje koncentrationer i leveren.
Enzymer kan få ødelagt deres struktur af bl.a. tungmetaller - og dermed holder de op med at virke. Vi vil se hvad der sker når vi putter en lille smule kobber ned til enzymet.
Materialer:
Skærebræt og kniv
Svinelever
Bægerglas 600 ml
Måleglas 25 ml og 100ml
Brintoverilte, 10%
Kobbersulfat 0,1 molær
Computer med tilsluttet vægt og LoggerPro
Fremgangsmåde:
1) Der skæres to stykker lever på ca. 2 g - så ens som muligt.
2) Det ene lægges i 40 ml vand i 15 minutter i et 600ml bægerglas..
3) Det andet lægges i 40 ml 0,1 M CuSO4 (Kobberopløsning)
3) Tænd vægt og computer
4) Start LoggerPro. Finder den ikke selv vægten så skal du ind og finde den under forsøg - tilslut sensor - Ohaus (prøv dig frem mht hvilken com-port den sidder på). Bemærk at vægten skal være tændt og vise en værdi. Hvis vægten viser err eller er slukket kan den ikke findes. Genstart evt. LoggerPro hvis det driller
5) Målingslængden indstilles ved at vælge forsøg - dataopsamling - skal være 10 minutter (600 sek)
6) Efter henstand i 15 minutter, placeres glasset med vand/lever på vægten. Umiddelbart før der tilsættes 20 ml H2O2 trykkes "Opsaml" på computerskærmen. Målingerne vil stoppe efter 10 min. Hvis du ønsker at afbryde målingerne tidligere, kan du trykke på "stop" på computerskærmen.
7) Klik til venstre på skærmen, her kan du både få tegnet en ret linie gennem punkterne, samt tegnet den bedste rette linie. Gem kurven, print den evt. ud. Bemærk du kan markere en del af måleserien og få tegnet bedste rette linie gennem den del
Data kan eksporteres eller behandles direkte i programmet. Husk under alle omstændigheder at gemme!
8) Punkt 6 og 7 gentages med glasset med kobbersulfat/lever